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差值分光光度法測(cè)定廢水中微量苯酚
發(fā)布時(shí)間：2017-09-01
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
(1)學(xué)會(huì)使用UV-2100紫外-可見光譜儀。
(2)掌握差值分光光度法測(cè)定廢水中微量苯酚的方法。
2、實(shí)驗(yàn)原理
酚類化合物在酸、堿溶液中發(fā)生不同的離解，其吸收光譜也將發(fā)生變化。例如，苯酚在紫外區(qū)有兩個(gè)吸收峰，在酸性或中性溶液中，λmax為210nm和272nm，在堿性溶液中，λmax位移至235nm和288nm。
在紫外分析中，有時(shí)利用不同的酸、堿條件下光譜變化的規(guī)律，直接對(duì)有機(jī)化合物進(jìn)行測(cè)定。
廢水中含有多種有機(jī)雜質(zhì)，干擾苯酚在紫外區(qū)的直接測(cè)定。如果將苯酚的中性溶液作為參比溶液，測(cè)定苯酚堿性溶液的吸收光譜，利用兩種光譜的差值光譜，有可能消除雜質(zhì)的干擾，實(shí)現(xiàn)廢水中苯酚含量的直接測(cè)定(見圖6.4)。這種利用兩種溶液中吸收光譜的差異進(jìn)行測(cè)定的方法，稱為差值分光光度法。
3、儀器和試劑
儀器：島津UV-2100紫外-可見分光光度計(jì)；
容量瓶：50mL，16個(gè)。
試劑：苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取苯酚0.3000g，溶于1L容量瓶，作為苯酚的公用標(biāo)準(zhǔn)溶液。
KOH溶液：1m01?L-1 。
4、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟
(1)配制苯酚的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液
將10個(gè)50mL容量瓶分成兩組，各自編號(hào)。按表6.2所示加入各種溶液，再用水稀釋至刻度，搖勻，作為苯酚的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。
(2)繪制苯酚的吸收光譜
①任意取上述一組溶液，用1cm吸收池，繪制苯酚中性溶液和苯酚堿性溶液的吸收光譜(分別以去離子水作參比溶液)。
②用苯酚的中性溶液作參比溶液，苯酚堿性溶液作樣品溶液，繪制苯酚在堿性溶液中的差值光譜。
(3)測(cè)定苯酚兩種溶液的光譜差值
從上述繪制的差值光譜中，選擇288nm附近最大吸收波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)λmax。在UV-2100上固定λmax，然后分組測(cè)定苯酚溶液兩種光譜的吸光度差值。
(4)未知試樣中苯酚含量的測(cè)定
將10個(gè)50mL容量瓶分成兩組，每組5個(gè)，分別加入未知樣。將其中5個(gè)用去離子水稀釋，其余5個(gè)加入5.OmL KOH溶液，再用去離子水稀釋至刻度，分別搖勻。分成3對(duì)，用1cm吸收池測(cè)定光度差值。
5 、注意事項(xiàng)
(1)在使用本儀器前，應(yīng)先了解儀器的結(jié)構(gòu)、功能和操作程序。
(2)儀器開機(jī)前，確認(rèn)樣品室中樣品架和參比架上沒有任何物品，并且樣品室的蓋子是關(guān)閉的。
(3)在自檢過程和掃描過程中，不要按動(dòng)任何鍵．不要任意打開樣品室蓋子。
(4)切勿將任何樣品或溶液濺于儀器上或樣品室內(nèi)，應(yīng)保持樣品室清潔和干燥。
(5)繪制紫外光區(qū)或紫外一可見光區(qū)吸收光譜時(shí)，使用石英吸收池；繪制可見光區(qū)吸收光譜時(shí)，使用玻璃吸收池。
(6)注意保護(hù)吸收池，吸收池的光學(xué)面必須清潔干凈，不準(zhǔn)用手觸摸。如果光學(xué)面外表面有污物或塵土，可用擦鏡紙輕輕拭去。吸收池內(nèi)部用去離子水沖洗，然后用少量乙醇或丙酮脫水處理，常溫放置干燥。
(7)對(duì)于易揮發(fā)試樣，應(yīng)在吸收池上蓋上玻璃片。
6、數(shù)據(jù)處理
(1)將表6.2中測(cè)得的光譜差值，繪制成吸光度一濃度曲線，計(jì)算回歸方程。
(2)利用所得曲線或回歸方程，計(jì)算未知樣品中苯酚的含量(用m01／L表示)的置信范圍(置信度95％)。
(3)計(jì)算苯酚在中性溶液(272nm附近)或堿性溶液(288nm附近)中的表觀摩爾吸收系數(shù)。
參考資料：現(xiàn)代儀器分析實(shí)驗(yàn)與技術(shù)
