差值分光光度法測定廢水中微量苯酚
發布時間：2017-09-01
1、實驗目的
(1)學會使用UV-2100紫外-可見光譜儀。
(2)掌握差值分光光度法測定廢水中微量苯酚的方法。
2、實驗原理
酚類化合物在酸、堿溶液中發生不同的離解，其吸收光譜也將發生變化。例如，苯酚在紫外區有兩個吸收峰，在酸性或中性溶液中，λmax為210nm和272nm，在堿性溶液中，λmax位移至235nm和288nm。
在紫外分析中，有時利用不同的酸、堿條件下光譜變化的規律，直接對有機化合物進行測定。
廢水中含有多種有機雜質，干擾苯酚在紫外區的直接測定。如果將苯酚的中性溶液作為參比溶液，測定苯酚堿性溶液的吸收光譜，利用兩種光譜的差值光譜，有可能消除雜質的干擾，實現廢水中苯酚含量的直接測定(見圖6.4)。這種利用兩種溶液中吸收光譜的差異進行測定的方法，稱為差值分光光度法。
3、儀器和試劑
儀器：島津UV-2100紫外-可見分光光度計；
容量瓶：50mL，16個。
試劑：苯酚標準溶液：稱取苯酚0.3000g，溶于1L容量瓶，作為苯酚的公用標準溶液。
KOH溶液：1m01?L-1 。
4、實驗內容與步驟
(1)配制苯酚的標準系列溶液
將10個50mL容量瓶分成兩組，各自編號。按表6.2所示加入各種溶液，再用水稀釋至刻度，搖勻，作為苯酚的標準系列溶液。
(2)繪制苯酚的吸收光譜
①任意取上述一組溶液，用1cm吸收池，繪制苯酚中性溶液和苯酚堿性溶液的吸收光譜(分別以去離子水作參比溶液)。
②用苯酚的中性溶液作參比溶液，苯酚堿性溶液作樣品溶液，繪制苯酚在堿性溶液中的差值光譜。
(3)測定苯酚兩種溶液的光譜差值
從上述繪制的差值光譜中，選擇288nm附近最大吸收波長作為測定波長λmax。在UV-2100上固定λmax，然后分組測定苯酚溶液兩種光譜的吸光度差值。
(4)未知試樣中苯酚含量的測定
將10個50mL容量瓶分成兩組，每組5個，分別加入未知樣。將其中5個用去離子水稀釋，其余5個加入5.OmL KOH溶液，再用去離子水稀釋至刻度，分別搖勻。分成3對，用1cm吸收池測定光度差值。
5 、注意事項
(1)在使用本儀器前，應先了解儀器的結構、功能和操作程序。
(2)儀器開機前，確認樣品室中樣品架和參比架上沒有任何物品，并且樣品室的蓋子是關閉的。
(3)在自檢過程和掃描過程中，不要按動任何鍵．不要任意打開樣品室蓋子。
(4)切勿將任何樣品或溶液濺于儀器上或樣品室內，應保持樣品室清潔和干燥。
(5)繪制紫外光區或紫外一可見光區吸收光譜時，使用石英吸收池；繪制可見光區吸收光譜時，使用玻璃吸收池。
(6)注意保護吸收池，吸收池的光學面必須清潔干凈，不準用手觸摸。如果光學面外表面有污物或塵土，可用擦鏡紙輕輕拭去。吸收池內部用去離子水沖洗，然后用少量乙醇或丙酮脫水處理，常溫放置干燥。
(7)對于易揮發試樣，應在吸收池上蓋上玻璃片。
6、數據處理
(1)將表6.2中測得的光譜差值，繪制成吸光度一濃度曲線，計算回歸方程。
(2)利用所得曲線或回歸方程，計算未知樣品中苯酚的含量(用m01／L表示)的置信范圍(置信度95％)。
(3)計算苯酚在中性溶液(272nm附近)或堿性溶液(288nm附近)中的表觀摩爾吸收系數。
參考資料：現代儀器分析實驗與技術
