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高效液相色譜法的優勢

發布時間:2013-11-28

高效液相色譜法與經典液相色譜法相比有哪些優點?


高效液相色譜法(HPLC)是20世紀60年代末至70年代初迅速發展起來的分離分析技術,它是在經典液相色譜的基礎上,引入氣相色譜的理論,在技術上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器,實現了分析速度快、分離效率高和操作自動化,這種柱色譜技術被稱做高效液相色譜法。


高效液相色譜法與經典液相色譜法比較具有如下優點。


(1)在分析速度上,高效液相色譜比經典的液相色譜要快數百倍。這是因為經典液相色譜是在常壓下靠重力加料,洗脫速度很慢,通常分離一個組分需要幾小時,甚至幾天,而高效液相色譜采用高壓泵輸液,流動相流速較高,個別可高達100mL/min以上,分析時間大大縮短。


(2)在分離效率上,高效液相色譜法比經典液相色譜法要高得多。經典液相色譜法,通常采用粒度較粗(100um)的固定相做填料,柱效率較低,而高效液相色譜法采用均勻的微顆粒(3~50um)做固定相,理論塔板數最高可達10萬/m。


(3)在樣品檢測上,高效液相色譜儀使用了新型的檢測器,檢測靈敏度大大提高,自動化程度也日趨完備。另外,經典的液相色譜柱一般只用一次。用后,其中的固定相即棄去,既費人力,又費物力,而高效液相色譜則使用密閉的、可重復使用的色譜柱,進樣采用注射器和進樣閥,準確而快速,操作方便,因此高效液相色譜對照品無論是在定性還是定量方面,都比經典的液相色譜有較高的準確性和精密度。

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