四季豆中皂素檢測
發(fā)布時間：2013-11-25
正丁醇層于錐形瓶中，水浴上揮于，殘渣用10 mI．乙醇溶解，加煅燒的MgO，4q60℃烘干，移人索氏脂肪抽提器中，加10 mL乙醇加熱回流2 h，過濾于錐形瓶中，水浴上加熱揮干，殘渣加氯仿l mI．溶解，加三氯化銻1 mL，在濾紙上反應，于70℃，2 min，在紫外燈下觀察，三萜皂甙顯藍色熒光；甾體皂甙顯黃色熒光。
四季豆又稱菜豆、蕓豆、蕓扁豆等，所含毒性物質皂素，是一類結構復雜的甙類。貯藏過久、炒煮不夠熟透的豆角常引起人食后中毒。四季豆中皂素檢測方法可用化學反應法、薄層層析法等。
一、化學反應法
1．試劑
①乙醇。
②正丁醇。
③氯仿。
④三氯醋酸。
⑤中性醋酸鉛液及堿性醋酸鉛液。
⑥稀H2S04(1+10)。(2)SbCl。溶液。2．檢測步驟取50 g樣品于蒸餾瓶中，加50 mI．乙醇，加熱回流2h h，過濾于錐形瓶中于水浴上揮干，殘渣用少量水溶解，移人分液漏斗中，加正丁醇30 mL，振搖，靜置分層。
①水層于錐形瓶中加過量中性醋酸鉛液，過濾，濾液加堿性醋酸鉛液，過濾。沉淀物一并收集于玻璃柱中，用10 mL乙醇淋洗，加5滴稀H。SG，蒸干。殘渣于錐形瓶中，用2 mL乙醇溶解，加5 mL乙醚，過濾，揮去醇醚，殘渣加氯仿1 mL溶解，加三氯醋酸液l mL，呈紅色為陽性，如果在濾紙上反應，于60℃，甾體，皂甙由紅一紫色；于100℃，三萜皂甙由紅一紫色。
②正丁醇層于錐形瓶中，水浴上揮于，殘渣用10 mI．乙醇溶解，加煅燒的MgO，4q60℃烘干，移人索氏脂肪抽提器中，加10 mL乙醇加熱回流2 h，過濾于錐形瓶中，水浴上加熱揮干，殘渣加氯仿l mI．溶解，加三氯化銻1 mL，在濾紙上反應，于70℃，2 min，在紫外燈下觀察，三萜皂甙顯藍色熒光；甾體皂甙顯黃色熒光。
3．說明
①水溶性皂甙，加過量中性醋酸鉛后，沉淀物為酸性皂甙；加堿性醋酸鉛后，沉淀物為中性皂甙。
②加煅燒過的MgO為吸附乙醇中粗皂甙，提取為精制皂甙。
