蔗糖的測(cè)定原理

發(fā)布時(shí)間：2013-11-25

蔗糖的測(cè)定

蔗糖是葡萄糖和果糖組成的雙糖，沒(méi)有還原性，不能用堿性銅鹽試劑直接測(cè)定，但在一定條件下，蔗糖可水解為具有還原性的葡萄糖和果糖。因此，可以用測(cè)定還原糖的方法測(cè)定蔗糖含量。

這里介紹還原糖法。

1．原理

樣品脫脂后，用水或乙醇提取，提取液經(jīng)澄清處理以除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，再用鹽酸進(jìn)行水解，使蔗糖轉(zhuǎn)化為還原糖。然后按還原糖測(cè)定方法分別測(cè)定水解前后樣品液中還原糖含量，兩者差值即為由蔗糖水解產(chǎn)生的還原糖量，乘以一個(gè)換算系數(shù)即為蔗糖含量。

2．儀器

①25mL古氏坩堝或G4垂融坩堝。

②真空泵。

③滴定管。

④水浴鍋。

3．試劑

①6mol·L-1鹽酸溶液。

②5mol·L-1氫氧化鈉溶液：稱取20g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。

③lmol·L-1氫氧化鈉溶液：稱取4g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100mL。

④費(fèi)林試劑甲液：稱取34．639g硫酸銅(CuSO4·5H2O)，加適量水溶解，加人0．5mL硫酸，加水稀釋至500mL，用精制石棉過(guò)濾。

⑤費(fèi)林試劑乙液；稱取173g酒石酸鉀鈉和50g氫氧化鈉，加適量水溶解并稀釋到500mL，用精制石棉過(guò)濾，貯存于橡皮塞玻璃瓶中。

⑥精制石棉：取石棉先用3 mol·L-1鹽酸浸泡2～3h，用水洗凈，再用10％氫氧化鈉浸泡2～3h。傾去溶液，再用堿性酒石酸銅乙液浸泡數(shù)小時(shí)，用水洗凈，再以3 mol·L-1鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)，用水洗至不呈酸性。加水振蕩，使之成為微細(xì)的漿狀軟纖維，用水浸泡并貯存于玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩堝。

⑦0．02mol·L-1高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取3．3g高錳酸鉀溶于1050mL水中，緩緩煮沸

20～30min，冷卻后于暗處密閉保存數(shù)日，用垂融漏斗過(guò)濾，保存于棕色瓶中。

標(biāo)定：精確稱取150～200℃干燥1～1．5h的基準(zhǔn)草酸鈉約0．2g，溶于50mL水中；加80mL硫酸，用配制的高錳酸鉀溶液滴定，接近終點(diǎn)時(shí)加熱至70℃，繼續(xù)滴至溶液呈粉紅色30s不褪為止。同時(shí)作空白試驗(yàn)。

計(jì)算：

c＝[﹙m×1000﹚÷134﹙V－V0﹚] ×﹙2／5﹚

式中：c——高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol·L-1；

m——草酸鈉質(zhì)量，g；

V——標(biāo)定時(shí)消耗高錳酸鉀溶液體積，mL；

V0——空白消禍高錳酸鉀溶液體積，mL；

134——草酸鈉的摩爾質(zhì)量，g·moL-1。

⑧硫酸鐵溶液：稱取50g硫酸鐵，加人200mL水溶解后加入100mL硫酸，冷卻后加水稀釋至1000mL。

⑨3mol·L-1鹽酸溶液：量取30mL濃鹽酸，加水稀釋至120mL。

⑩甲基紅乙醇溶液(0．1％)：稱取0．1g甲基紅，用60％乙醇溶解并定容到100mL。

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